NY∕T 2888.2-2016 真菌微生物农药 木霉菌 第2部分:木霉菌可湿性粉剂(农业)
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15 |
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日期: |
2021-12-24 |
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ICS 65.100.,,30,B 17 NY,中华人民共和国农业行业标准,NY/ T 2888.1-2016,真菌微生物农药木霉菌,第1 部分:木霉菌母药,Fungal pesticides-Trichoderma spp.-,Part 1 : Trichoderma spp. technical concentrates (TK ),2016-05-23 发布2016-10 - 01 实施,;(e 中华人民共和国农业部发布,NY j T 2888. 1-2016,目U 昌,NY j T 2882 (( 真菌微生物农药木霉菌》分为2 部分:,一一第1 部分: 木霉菌母药;,一一第2 部分: 木霉菌可湿性粉剂,本部分为NYj T 2882 的第1 部分,本部分按照GB/ T 1. 1-2009 给出的规则起草,请注意本文件的某些内容可能涉及专利,本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任,本部分由农业部种植业管理司提出并归口,本部分起草单位:农业部农药检定所、上海交通大学,本部分主要起草人:袁善奎、陈捷、姜辉、周欣欣、李雅乾、师丽红、瞿唯钢、王以燕、王一苗,I,范围,真菌微生物农药木霉茵,第1 部分:木霉菌母药,NY/ T 2888. 1-2016,本部分规定了真菌微生物农药木霉菌母药的要求、试验方法、标志、标签、包装、贮运及验收,本部分适用以棘抱木霉CTrichodermαα5ρereLLum) 、哈茨木霉C Trichodermα harzianum) 、深绿木,霉CTrichodermα atroviride) 等木霉菌种为活性成分的粉状木霉菌母药,注: 上述3 种木莓菌菌种有效成分描述参见附录A ,2 规范性引用文件,下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文,件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件,GB/ T 191 包装储运图示标志,GB/ T 1601 农药p H 值的测定方法,GB/ T 1604 商品农药验收规则,GB/ T 1605 商品农药采样方法,GB 3796 农药包装通则,GB/ T 8170- 2008 数值修约规则与极限数值的表示和判定,GB/ T 30361 农药干燥减量的测定方法,3 术语和定义,下列术语和定义适用于本文件,3. 1,木霉菌母药Trichoderma spp. technical concentrate (TK),由木霉菌纯菌种经生物发酵生产而获得的高含量分生抱子或厚垣子包子粉,通常情况下还会包含伴,随发酵过程的少量生物组分和化学杂质,3. 2,菌落形成单位colony forming units ( CFU),将木霉菌母药用无菌水稀释后得到的菌液通过涂布的方法,让其单个抱子分散在琼脂平板上,待培,养后每个抱子形成一个特定菌落,即一个菌落形成单位CCFU) ,通过肉眼观察菌落的数量来推算单位微,生物农药样品中的含抱量,3. 3,3. 4,含于包量spore content,每克木霉菌母药中所含的抱子数量,所含抱子数量包括分生殖子和厚垣抱子,注: 单位为菌落数每克CCFU/ g) ,杂菌率microbial contaminant,木霉菌母药中除了木霉菌外,其他微生物(如真菌和细菌等)量占总菌量的百分率,NY/ T 2888. 1-2016,4 要求,4.1 外观,经生物发酵生产而获得的高含量分生或厚垣抱子粉,一般为绿色粉状物,由于菌种或发酵基质的不,同颜色偶有差异,通常情况下还会包含伴随发酵过程的少量生物组分和化学杂质,但应为均匀疏松的粉,末,不可有团块,4. 2 指标,木霉菌母药质量控制项目指标应符合表1 要求,含于包量, CFU! g,杂菌率, %,干燥减量, %,pH,5 试验方法,5. 1 抽样,表1 木霉菌母药控制项目及指标,项吕指标,二主20X108,~ l. 0,主二1 2. 0,6. O~8. 0,按照GB/ T 16 05 规定进行样品的采集,用随机数表法确定抽样的包装件,最终抽样量不少于,100 g 。采样时应特别注意避免样品污染,采样容器和工具应经过消毒灭菌,样品采集后应立即进行检,验,若不能立即检验,应于4 0C 条件下贮存,5. 2 菌种鉴别,采用DNA 条形码的标准基因进行检测,并可辅助形态学特征进行菌种鉴别,鉴别方法参见附录B ,5. 3 含抱量测定,采用平板菌落计数法,单位为CFU/ g ,5. 3. 1 试剂和溶液,a) 脱氧胆酸铀(化学纯) ;,b) 马铃薯葡萄糖琼脂(PDA) 培养基;,c) 蛋白陈营养琼脂(NA) 培养基;,d) 无菌水: 121 0C 蒸汽灭菌30 min ,冷却后备用,5. 3. 2 主要仪器、设备,a) 培养皿:直径90mm ,高16 mm~ 17 mm;,b) 分析天平:精度为0 . 001 g;,c) 移液器;,d) 高压蒸汽灭菌器;,e) 超净工作台;,f) 恒温振荡器;,g) 恒温培养箱(控温范围OOC~500C ,控温误差士2 0C) ;,h) 恒温水浴锅;,i) 生物显微镜: X 1000 倍,5. 3. 3 试验步骤,5. 3. 3. 1 样品的准备,在无菌操作条件下,将样品搅拌均匀,准确称取1. 00 g 样品,溶入100 mL 的无菌水中、浸泡30 min,2,NY/ T 2888. 1-2016,后,振荡30 mi n ,得到稀释100 倍的样品溶液,标记为l 号。然后参照表2( 以稀释6 次为例)进行梯度,稀释,编号,灭菌水体积, mL,加入上一稀释浓度溶液的体积, m……
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